33. Тофизопам (tophisopam@newmail.ru) 2003/04/21 18:16
[ответить]
А Димон выделил полтора миллиграма 5В!! Даже на FPLC чистить не надо!!
32. (Lexxa@land.ru) 2003/04/17 17:21
[ответить]
Тут так умно говорили, я прямо зачитался. Было бы интересно отредактировать и выставить на обозрение, чес слово.
31. (Vasili.Hauryliuk@icm.uu.se) 2003/04/15 20:52
[ответить]
>>30.Тофизопам
>Кто тебе сказал, что у них море аспирантов?
>Думаешь зачем тебя брали?
>А Суслова они почему чуть не взяли?
да я просто их видал, этих аспирантов. Аспирантов в широком смысле этого слова - там есть аспиранты от дипломников до мнсов, довольно большая куча.
30. Тофизопам (tophisopam@newmail.ru) 2003/04/15 20:51
[ответить]
Кто тебе сказал, что у них море аспирантов?
Думаешь зачем тебя брали?
А Суслова они почему чуть не взяли?
29. (Vasili.Hauryliuk@icm.uu.se) 2003/04/15 20:44
[ответить]
>>27.Тофизопам
>А ты переклонировать не пробовал?
>Напиши Фроловой, чтоб она по-быстренькому переставила его куда-нибудь!
>
>
хм, да я и думаю, зря ты смеешся. превезу шас в москву все плазмиды, сдам им, пусть переклонируют в один вестор всех, дабы меньше геммороиться.
есть на выбор пара векторов.
у них там аспирантов дохрена, а я тут всё-таки один :)
28. (Vasili.Hauryliuk@icm.uu.se) 2003/04/15 20:41
[ответить]
>>25.Тофизопам
>Значит все вопросы к Димону!!
>Он имел 5В (хотя, это большой вопрос, кто кого имел - они друг друга до сих пор имеют) растя его при 30 градусах, и, что оказалось важно, наращивал культуры (до нужной ОД) тоже при 30. И еще, как ни странно, он лучше нарабатывался в небольшом объеме.
про малый обьем это стандартная маза.
я думаю, это проблема аэрации, вроде как можно увеличить обьем если наливать 1/15 обьема колбы, гладкодонной (а то пена и жопа клеткам) - я вот в 6 литровую наливаю 400 мл, вроде пока растут :) оди вроде движется как надо, как в малом обьеме.
тока бы не удшло в тела включения или не лизировалось. еще 30 минут растить. тьфу-тьфу-тьфу. господи помоги им :)
27. Тофизопам (tophisopam@newmail.ru) 2003/04/15 20:39
[ответить]
А ты переклонировать не пробовал?
Напиши Фроловой, чтоб она по-быстренькому переставила его куда-нибудь!
26. (Vasili.Hauryliuk@icm.uu.se) 2003/04/15 20:38
[ответить]
>>25.Тофизопам
>Значит все вопросы к Димону!!
>Он имел 5В (хотя, это большой вопрос, кто кого имел - они друг друга до сих пор имеют) растя его при 30 градусах, и, что оказалось важно, наращивал культуры (до нужной ОД) тоже при 30. И еще, как ни странно, он лучше нарабатывался в небольшом объеме. Очистка обязательно должна включать FPLC.
эх.. всё, ильюха, зависит еще от того, каой вектор для экспрессии.
у меня очень текучая хрень, Е7 в коюей можно придавить в пЛис С клетках, но проблнема в том, что тогла лизируется само уж слишком легко.
ну, выясню как там у димона.
я свой при 30 тоже пробовал, не помогает.
вроде как работает малый обьем, сильная аэрация, среда 2 уай ти, индукция 4 милимоля ИПТГ один час, всё в клетках пЛис С. Такой вот гемор. шас какраз рашу большую среду и вечером узнаю - как оно, работает или нет :))
еще есть второй кайф - дрожжевой первый терминационный фактор, тоже геморой конкретный. :(
25. Тофизопам (tophisopam@newmail.ru) 2003/04/15 20:32
[ответить]
Значит все вопросы к Димону!!
Он имел 5В (хотя, это большой вопрос, кто кого имел - они друг друга до сих пор имеют) растя его при 30 градусах, и, что оказалось важно, наращивал культуры (до нужной ОД) тоже при 30. И еще, как ни странно, он лучше нарабатывался в небольшом объеме. Очистка обязательно должна включать FPLC.
24. (Vasili.Hauryliuk@icm.uu.se) 2003/04/15 20:02
[ответить]
>>23.Тофизопам
>>Так я не понял, ты 4В или 5В выделяешь?
>